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不同产地赤芍野生品与栽培品有什么区别?

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更新时间:2019年12月23日19:47:10 打印此页 关闭
摘要: 摘    要: 目的:比较不同产地赤芍及其栽培品的药材性状、显微特征差异。方法:赤芍的药材性状及其显微组织特征比对, 显微数量分析方法。结果:不同产地的赤芍比较显示, 道地产地多伦产赤芍呈圆柱形, 并较其他产地药材直而长, 外皮具排列紧密的纵沟纹, 较易剥落, 断面粉白色;根的横切面导管切向排列, 并与木纤维束...
    要:

目的:比较不同产地赤芍及其栽培品的药材性状、显微特征差异。方法:赤芍的药材性状及其显微组织特征比对, 显微数量分析方法。结果:不同产地的赤芍比较显示, 道地产地多伦产赤芍呈圆柱形, 并较其他产地药材直而长, 外皮具排列紧密的纵沟纹, 较易剥落, 断面粉白色;根的横切面导管切向排列, 并与木纤维束整齐交互排列;木纤维束由4~19个纤维组成。赤芍的栽培品与野生品药材性状、显微组织方面的差异表现为:栽培品的根呈圆锥状, 须根多, 外皮较平滑, 气味弱;根横切面栽培品导管的排列方式与野生品不同, 栽培1~2年的根导管稀疏, 径向排列, 三、四年生的外侧导管呈团块排列;五、六年生的根外侧导管有切向排列;赤芍栽培品淀粉粒较多, 单位观察面积数量2656个/mm2, 草酸钙簇晶数量较少, 27个/mm2;而野生品的淀粉粒数量较少, 1791个/mm2, 草酸钙簇晶较多, 72个/mm2。结论:道地药材多伦赤芍与其他产地药材略有差异, 可以根据其外观形态和木纤维束情况区别其他产地赤芍。赤芍野生品和栽培品在药材性状和显微组织上存在差异, 外观性状的差异、根横切面导管的排列方式和单位面积草酸钙簇晶和淀粉粒的数目, 可作为两者的鉴别特征。

赤芍为具有活血化瘀, 清热凉血、散瘀止痛功效的常用中药, 其主要来源为毛茛科植物芍药Paeonia lactifolra Pall.野生种群的根。长久以来市场流通的赤芍均为野生品, 并以内蒙古多伦县出产赤芍为道地药材, 称“多伦赤芍”[1]。根据赤芍的资源调查, 野生芍药的野生资源在逐渐减少, 表现为野生芍药的能够生长的区域范围在缩小和北移。河北、内蒙古一些20世纪80年代赤芍的主要产区, 收购量急剧减少, 道地药材“多伦赤芍”目前年收购量不足500 kg, 出现了生产性濒危[2]。随着近年来临床需求量的不断加大, 及赤芍资源的紧缺, 在内蒙古、黑龙江、吉林、安徽等地出现了野生芍药的试验性栽培, 即以野生芍药的种子或根头在大田或果林下人工种植。道地药材“多伦赤芍”与其他产地赤芍, 赤芍的野生品与栽培品在药材性状和显微方面的差异, 是赤芍药材质量控制和资源利用中值得关注的问题。赤芍试验性栽培引来的问题还有, 与其同物种的传统药用栽培品, 是功效完全不同的另一种常用中药白芍, 赤芍栽培是否会引起药性的改变, 值得关注。传统认为多伦赤芍的药材性状具有“糟皮粉碴”的特征;前人对于赤芍的药材性状与显微组织研究, 多限于芍药属不同物种、中药赤芍与白芍的鉴别研究[3,4,5,6]。对于赤芍不同产地药材, 赤芍野生品与栽培品药材性状与显微组织的比较研究少有涉及。本文选取多伦产和其他产区的赤芍野生品, 以及赤芍的栽培品进行药材性状与显微组织的比较研究, 试图为赤芍道地药材与其他产地药材、赤芍野生品与栽培品的鉴别, 为制订赤芍道地药材的质量标准提供理论依据。

1 材料

实验样品分别收购或采集自中药赤芍道地产区、主产区与赤芍试验栽培地, 收集地点涉及7个省、区, 其中野生赤芍样品30份, 栽培赤芍8份, 所有样品经中国中医科学院中药研究所冯学锋副研究员鉴定均为毛茛科植物芍药P. lactifolra的根, 见表1, 2。

表1 野生赤芍样品 导出到EXCEL



产地 采集日期 产地 采集日期
内蒙古多伦县 2003-07, 2004-09, 2007-10, 2009-09 内蒙古鄂伦春旗阿里河镇 2007-08
内蒙古阿尔山市明水镇 2007-08 河北丰宁县 2008-06
内蒙古陈巴尔虎旗 2007-08 河北崇礼县太平庄 2008-06
内蒙古海拉尔市 2007-08, 2008-07, 2009-07 河北赤城县独石口镇 2008-06
内蒙古额尔古纳市恩河乡 2007-09, 2009-07 河北青龙县 2007-10
内蒙古阿尔山市郊 2007-07 辽宁凤城 2008-09, 2008-09
内蒙古兴安盟突泉县宝石镇 2007-07 辽宁西丰县 2009-09
内蒙古兴安盟科右前旗 2007-08 黑龙江密山市 2009-09
内蒙古鄂伦春旗 2008-08 黑龙江完达山 2009-09
内蒙古牙克石市乌尔旗汉镇 2007-08 黑龙江伊春市 2009-09
内蒙古乌兰浩特市索伦镇 2009-07 黑龙江佳木斯市 2009-09
内蒙古牙克石市 2007-08 山西柯岚 2008-08



表2 栽培赤芍样品 导出到EXCEL



产地 采集日期 生长年限
吉林四平市 2009-08 1~6
黑龙江大庆 2009-07 3
安徽亳州 2009-05 3



2 方法

2.1 根横切片制备

选取芍药根部, 软化, 常规石蜡切片、滑走和徒手切片法制片。

2.2 粉末制片的制备

选取赤芍各地样品5~10个样品粉碎, 过80目筛。取样品粉末40 mg, 加醋酸甘油试液 (冰醋酸-甘油-水 1∶1∶1) 1 mL, 混匀。取混悬液0.08 mL置载玻上, 用22 mm×22 mm盖玻片封片。

2.3 显微特征计量与测量方法

将每张样品制片平分9为个区域, 每个区域在光学显微镜下, 用网格测微尺分别统计一个观测视野中淀粉粒 (0.01 mm2) 或草酸钙簇晶 (0.16 mm2) 的数量, 合并数据;每样品观测5张制片, 统计平均值。计算单位面积 (1 mm2) 中淀粉粒或草酸钙簇晶的数量。

随意选取20个淀粉粒或草酸钙簇晶用测微尺测量直径, 统计最大值、最小值、平均值。野生赤芍为10个产地、栽培赤芍为3个产地样品。

2.4 统计分析

对粉末显微特征 (淀粉粒或草酸钙簇晶) , 分别赤芍野生品组与栽培品组计算平均值, 采用t检验判别组间差异的显著性。

2.5 仪器型号

光学显微镜型号OLYMPUS-BX51, 显微数码摄影仪型号OLYMPUS-DP71。

3 结果

3.1 赤芍药材性状比较分析

3.1.1 赤芍野生品的药材性状

根呈圆柱形, 稍弯曲, 长7~40 cm, 直径 0.3~1.9 cm。表面颜色不同产地表现出不同, 大致分为淡棕褐色, 淡黄褐色、黑棕色、灰棕色、黄棕色5种;粗糙, 有纵沟及皱纹, 并有须根痕及横向凸起的皮孔, 有的外皮易剥落。质硬而脆, 易折断。断面颜色粉白色, 黄白色、棕色、棕褐色等多种颜色, 皮部窄, 木部放射状纹理明显。气微香, 味微苦、酸涩。

多伦产赤芍根较其他产地药材略直而长, 长15.7~39.4 cm, 直径0.42~1.92 cm。表面淡棕褐色, 多具有细密且排列紧密的纵沟纹, 横向凸起的皮孔明显, 外皮较易剥落。断面多粉白色, 少见有裂隙。西丰、凤城产赤芍药材性状与其他产地不同, 根略呈圆锥状或扁圆柱形, 断面棕色, 纤维性较强。

3.1.2 赤芍栽培品主要药材性状

根呈圆锥状, 皮部与木部结合紧密, 外皮较平滑, 不具或具有较浅的纵沟纹, 凸起的皮孔明显, 多见须根痕, 外皮不易剥落。质地坚实, 不易折断, 断面平坦, 细腻, 不具裂隙, 木射线木部放射状纹理不明显。气微, 味微苦、酸涩。不同地域栽培的赤芍, 气味略有不同, 如亳州产的气味较弱。

3.2 赤芍根横切面显微组织结构比较

3.2.1 赤芍野生品的横切面

木栓层10余列棕色细胞, 排列紧密, 类长方形。皮层为数列薄壁细胞, 外侧薄壁细胞角隅处有增厚。韧皮部由筛管、伴胞和薄壁细胞组成。形成层明显, 呈微波状环, 为数列切向延伸、排列紧密的薄壁细胞组成。木质部由导管、木纤维、木薄壁细胞和射线细胞组成。导管类圆形或多角形, 在木质部中部呈径向排列或团块状排列, 外侧呈切向排列。木纤维类方形或多角形, 分布在导管周围, 多成束。有的产地在木质部的外侧切向排列的导管常与木纤维束交互排列, 呈现年轮状。木射线宽, 由5~10列细胞组成。木质部中心可见二至三元型初生木质部。薄壁细胞含众多草酸钙簇晶与淀粉粒, 见图1。

图1 赤芍根横切面

图1 赤芍根横切面   下载原图


A.赤芍野生品 (内蒙古多伦) ;B.赤芍栽培品 (吉林四平, 四年生) ;1.木栓层;2.皮层;3.韧皮部;4.形成层;5.木质部;6.初生木质部;7.草酸钙簇晶。

不同产地的赤芍根横切面的差异主要表现为, 木质部导管与木纤维的排列情况和木纤维的多少。如多伦产的赤芍导管与木纤维束交互排列, 略呈年轮状;木纤维束较小, 一般由4~19个纤维组成。凤城产赤芍的导管与木纤维束交互排列明显, 木纤维束较大, 由7~24个纤维组成。完达山产赤芍木纤维束少, 导管排列不呈年轮状, 见图2。

3.2.2 赤芍栽培品 (四年生) 根横切面

与野生品不同处:木质部导管呈断续的径向排列或团块状排列, 在切向排成断续的环。不同生长年限的芍药根木质部导管排列的方式有一定差异。一至二年生的根导管稀疏, 径向排列;三至四年生的根外侧导管呈团块排列;五至六年生的根外侧导管有切向排列。

图2 赤芍野生品木质部组织

图2 赤芍野生品木质部组织   下载原图


A.内蒙古多伦产;B.辽宁凤城产;1.导管;2.木纤维束。

可以从导管切向的环推测芍药的生长年限。薄壁细胞含淀粉粒众多, 而草酸钙簇晶较少, 见图1。

3.3 赤芍粉末显微特征比较

3.3.1 赤芍野生品与栽培品粉末显微特征

赤芍野生品与栽培品粉末比较发现, 两者在草酸钙簇晶和淀粉粒有差异。赤芍野生品粉末草酸钙簇晶较多, 淀粉粒较少而小;栽培品粉末中淀粉粒较多, 且较大, 草酸钙簇晶较少, 见图3。

图3 赤芍粉末显微特征

图3 赤芍粉末显微特征   下载原图


A.野生品 (多伦) ;B.栽培品 (亳州) ;1.草酸钙簇晶;2.淀粉粒。

3.3.2 赤芍野生品与栽培品草酸钙簇晶数量分析

赤芍野生品草酸钙簇晶直径为12.4~46.9 μm, 栽培品的直径为 17.4~37.1 μm, 两者平均值t检验结果为t=2.299, P<0.05, 显示赤芍野生品与栽培品草酸钙簇晶直径有显著差异。赤芍野生品单位观测面积平均有草酸钙簇晶72个/mm2, 栽培品为27个/mm2;平均值t检验, t=3.751, P<0.01, 显示两者草酸钙簇晶平均数量有极显著差异, 见表2。

3.3.3 赤芍野生品与栽培品淀粉粒数量分析

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